中药注射剂对细胞色素P4502C9酶活性及细胞色素P4502C9底物的药物代谢影响的研究现状
baidu 2022-03-20 14:00:51
原标题：中药注射剂对细胞色素P4502C9酶活性及细胞色素P4502C9底物的药物代谢影响的研究现状
中药注射剂对细胞色素P4502C9酶活性及细胞色素P4502C9底物的药物代谢影响的研究现状
来源
中国临床药理学杂志 第33卷第12期2017年6月(总第242期)
作者
常泽娜，杨长青
中国药科大学基础医学与临床药学学院
摘要
临床上应用的中药注射剂有上百种，但其对细胞色素P4502C9酶活性的研究却很少。
中药注射剂对CYP2C9酶的活性不管是抑制或是诱导作用，在应用经CYP2C9代谢的药物时，要重视中药注射剂对其的影响，可能会产生代谢性药物相互作用，为避免药物不良反应发生率增加、药物疗效降低，中药注射剂对CYP2C9酶活性的影响研究值得关注。
本文将中药注射剂对CYP2C9酶的活性影响的研究进行了总结和分析，了解中药注射剂对CYP2C9酶活性的影响的研究现状。
关键词
中药注射液;细胞色素P4502C9酶;细胞色素P4502C9底物;药代动力学;药物相互作用
正文
2015年，全国药品不良反应监测网络共收到中药注射剂报告12.7万例次，其中严重报告9798例次(7.7%)［1］。
近年来中药注射液与其他药物联合应用情况增多，难以预料这一过程中发生的药物不良反应，特别是经细胞色素P450(CYP450)酶介导的代谢性药物相互作用，代谢性相互作用约占药代动力学相互作用的40%［2］。
本文将中药注射剂对CYP2C9酶的活性影响进行了总结和分析，以期了解中药注射剂对CYP2C9酶活性的影响提供参考。
内容由凡默谷小编查阅文献选取，排版与编辑为原创。如转载，请尊重劳动成果，注明来源于凡默谷公众号。
1
CYP450酶的简介
CYP450酶是基因超家族编码形成的一群蛋白酶，即多种同工酶，他们具有共同的结构特征。
CYP由多个基因家族组成，其中主要有6种重要的亚型:CYP1A2、CYP3A4、CYP2C9/19、CYP2D6和CYP2E1，他们参与90%以上的药物代谢过程［3］。
1.1 CYP2C9蛋白的介绍
CYP2C9蛋白由490个氨基酸残基组成，分子量53kDa的一种膜结合的血红蛋白。
CYP2C亚型占人体肝CYP酶的20%，CYP2C9、CYP2C19是第二亚家族中的重要组成部分。
目前经CYP2C9代谢的药物约有16%［4］，其中主要有抗惊厥药苯妥英;抗凝血药华法林;抗糖尿病药甲苯磺丁脲;非甾体抗炎药双氯芬酸;抗高血压药厄贝沙坦;利尿药托拉塞米;此外还有丙戊酸钠、苯巴比妥、氟伐他汀、他莫昔芬和磺胺异恶唑等。
其中，苯妥英钠、(S)－华法林和甲苯磺丁脲等的治疗窗狭窄，安全性低［5］。
关于化学药物对CYP2C9的影响的研究已经比较完善，而中药注射液方面对CYP2C9的影响研究较少。
因此，评价中药注射液对CYP2C9酶的作用非常重要。
1.2 CYP2C9探针底物的介绍
甲苯磺丁脲、双氯芬酸是CYP2C9的经典探针药物，其代谢程度常用于评估CYP2C9的活力。
甲苯磺丁脲在CYP2C9催化下发生羟化，生成4－羟基甲苯磺丁脲，其中还有极少一部分由CYP2C19代谢，可忽略其对甲苯磺丁脲的代谢作用。
但当CYP2C9缺陷时，不能忽略CYP2C19对甲苯磺丁脲的催化作用。
双氯芬酸几乎完全经CYP2C9代谢为4－羟基双氯芬酸，美国食品药品监督管理局(FDA)已经证实并推荐使用双氯芬酸来研究CYP2C9酶的活性。
2
中药注射液的概况
中药注射剂突破了中药传统的给药方式，截至2016－12－31，国家食品药品监督管理总局网站数据库能查询到的中国已上市中药注射剂品种125个，涉及批准文号967个。
然而由于中药注射剂上市前研究的局限性，如人与动物间的种属差异、疾病谱、受试者年龄范围、用药人群范围、临床研究的病例数、观察时间、病例入组、合并用药、研究时限等诸多限制，且其成分比较复杂。
整理对CYP2C9酶活性影响的中药注射剂为后续临床使用合理性与安全性再评价研究提供依据和参考。
3
中药注射液剂对CYP2C9酶活性的调控作用
中药注射剂的种类、厂家、批号繁多，但是中药注射剂对CYP2C9作用情况研究却很少，主要涉及一些常用的品种。
内容由凡默谷小编查阅文献选取，排版与编辑为原创。如转载，请尊重劳动成果，注明来源于凡默谷公众号。
3.1 体内研究中药注射剂对CYP2C9酶的影响
中药注射液可以通过抑制CYP2C9酶活性，从而导致物代谢速度减慢，在体内滞留时间延长，提高药物治疗疗效的同时也存在蓄积的风险，从而增加药物不良反应发生的风险。
若诱导CYP2C9酶活性，则会使药物代谢加快，降低药物治疗药效，从而影响疾病的治疗。
3.1.1 中药注射剂对CYP2C9酶的抑制作用
薛清丹等［6］研究结果表明，随着复方丹参注射液给药剂量的增加，甲苯磺丁脲的t1/2，曲线下面积(AUC)逐渐增大，清除率(CL)逐渐降低，复方丹参注射液对CYP2C9有一定的抑制作用，且呈剂量依赖型的结论。
郑琳［7］通过Cocktail探针药物法参芎葡萄糖注射液对CYP2C9酶的作用，结果显示，7，14d组的主要药代动力学参数AUC0－t、AUC0－∞、平均驻留时间(MＲT0－t)、MＲT0－∞、Cmax、t1/2z较空白对照组显著增高，CLz较空白对照组显著降低(P＜0.01)，说明给予参芎葡萄糖注射液7，14d后对CYP2C9存在显著抑制作用，而随着参芎葡萄糖注射给药时间增长，其抑制作用也增强。
李晓宇等［8］通过研究三七总皂苷注射液对探针药物华法林钠的影响，结果表明华法林钠的t1/2β、Cmax、tmax、AUC0－t、AUC0－∞、CL、MＲT0－t在生理盐水组和三七总皂苷组无统计学差异，但三七总皂苷使华法林钠tmax、t1/2、AUC有增加的趋势，表明三七总皂苷可能增加华法林钠在大鼠体内的暴露程度，对CYP2C9可能有一定的抑制作用。
3.1.2 中药注射剂对CYP2C9酶的诱导作用
徐洁［9］用Cocktail法研究艾迪注射液对大鼠体内P450酶活性的影响，结果表明，艾迪注射液使甲苯磺丁脲的AUC显著降低，降低至给药前的0.61倍，提示艾迪注射液能诱导CYP2C9酶的活性。
谢丽艳等［10］用Cocktail法快速评价消癌平注射液CYP450同工酶的影响，甲苯磺丁脲的AUC0－24h与给药前相比显著降低，连续给药14d临床剂量消癌平注射液对大鼠CYP2C9有诱导作用。
3.1.3 中药注射剂对CYP2C9酶无作用
张国勇等［11］研究表明，参麦注射液对大鼠CYP2C9亚型的活性无显著性影响。赵文婷等［12］研究表明，疏血通注射液对大鼠对CYP2C9亚型的活性无显著影响。
内容由凡默谷小编查阅文献选取，排版与编辑为原创。如转载，请尊重劳动成果，注明来源于凡默谷公众号。
3.2 体外研究中药注射液对CYP2C9酶的影响
3.2.1 中药注射剂对CYP2C9酶的抑制作用
刘丽雅等［13］选取10种心血管类中药注射剂用探针药物与人肝微粒体中共同孵育，LC－MS/MS同时测定探针药物的代谢产物质量浓度，结果表明，只有丹红注射液在正常体积分数/质量浓度(0.4%～1.6%)下对CYP2C9的IC50值为0.98%，有明显抑制作用。
双氯芬酸的代谢产物4－羟基双氯芬酸的酶动力学参数Km=16.9μmo1·L－1。
银杏叶提取物注射液对CYP2C9的IC50为12.91%，在体外对CYP2C9有轻度抑制作用;参麦注射液对CYP2C9的IC50为3.68%，在体外对CYP2C9有抑制作用;参附注射液对CYP2C9的IC50为5.23%，在体外对CYP2C9有抑制作用。
房庆东［14］测得4－羟基双氯芬酸的酶动力学参数Km为17.1μmol·L－1，肾康注射液对CYP2C9的IC50为5.9%，丹红注射液对CYP2C9的IC50为1.1%，对CYP2C9均有抑制作用。
潘洁等［15］研究艾迪注射液对体外人和大鼠肝微粒体中CYP450酶的抑制作用并比较种属差异性，将艾迪注射液分别与混合探针底物共同孵育，UPLC－MS/MS检测各探针底物的代谢物生成量，CYP2C9特异性抑制剂磺胺苯吡啶对人和大鼠肝微粒体中CYP2C9的IC50为0.78，2.52μmo1·L－1。
艾迪注射液对人和大鼠肝微粒体中CYP2C9(甲苯磺丁脲)的IC50值分别为9.27%和4.10%，对CYP2C9有抑制作用。
消癌平注射液等4种抗肿瘤中药注射剂对人肝微粒体中CYP450酶7种亚型酶活性研究结果显示［16］:消癌平注射液对CYP2C9的IC50为0.93%，艾迪注射液对CYP2C9的IC50为16.31%，华蟾素注射液和康艾注射液对CYP2C9的活性抑制率＜50%，在体外正常剂量下消癌平注射液对人CYP2C9均有明显抑制作用，艾迪注射液、华蟾素注射液和康艾注射液对CYP2C9的活性无明显抑制。
利用人肝微粒体、喜炎平注射液与探针底物在还原系统烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸还原酶(NADPH)的作用下，37℃水浴下共同孵育。LC－MS测定探针底物的代谢产物生成量，喜炎平注射液对CYP2C9酶亚型活性抑制的IC50值为1.44mg·mL－1，喜炎平注射液对CYP2C9有弱的抑制作用［17］。
3.2.2 中药注射剂对CYP2C9酶的诱导作用
将肝微粒体与CYP450同工酶探针药物甲苯磺丁脲共同孵育，用ＲT－PCＲ方法，检测参麦注射液对药物代谢酶mＲNA表达。
结果显示，与空白组相比，参麦注射液和麦冬注射液对CYP2C9均有诱导作用(P＜0.05)，红参注射液与空白对照组具有显著的诱导作用［18］。
在热毒宁注射液对大鼠肝微粒体CYP450酶的诱导作用研究，结果显示［19］，热毒宁注射液低剂量组对大鼠CYP2C9无明显作用，中高剂量组对CYP2C9有显著的诱导作用，且高剂量组的诱导大于中剂量组的诱导作用。
3.2.3 中药注射剂对CYP2C9酶无作用
丹参注射液用探针药物法对大鼠肝微粒体CYP450酶的影响［20］，用UPLC－MS/MS检测探针甲苯磺丁脲代谢物的剩余量，显示丹参注射液对CYP2C9的IC50值为3.32g·mL－1，对其有弱抑制作用。
但对人肝微粒中CYP2C9的IC50值大于50μg·mL－1人CYP2C9没有抑制作用。研究灯盏花注射液对大鼠肝微粒体中CYP450酶的活性作用［21］，结果显示，灯盏花射液对大鼠肝微粒体中CYP2C9(甲苯磺丁脲)的IC50值大于200μg·mL－1，对CYP2C9没有影响。
张咏莉等［22］与孙佳等［23］结果表明，黄芪注射液和参芎葡萄糖注射液对人肝微粒体CYP2C9无明显抑制作用。
研究清开灵注射液及其主要成分黄芩苷和栀子苷对人肝微粒体CYP2C9的体外抑制作用［24］，用LC－MS/MS测定4－羟基双氯芬酸，预测清开灵注射液在正常剂量下对人肝微粒体CYP2C9无明显抑制作用。胡晋卿等［25］用Cocktail反应体系，用LC－MS/MS法测定代谢产物，甲苯磺丁脲4－羟基化反应生成4－羟基甲苯磺丁脲作为评价CYP2C9酶活性的指标，异甘草酸镁共孵育后对CYP2C9的体外酶活性，在1～50mol·L－1均未见明显抑制CYP2C9。
4
讨论
在上述中药注射液中参芎葡萄糖注射液在体内研究显示抑制CYP2C9［7］，而在体外研究却显示对CYP2C9酶活性无影响［23］;
艾迪注射液在体的研究显示有诱导作用［9］，然而体外实验却结果显示抑制作用［15］;消癌平注射液在大鼠体内研究显示对CYP2C9有诱导作用［10］，体外研究显示对人CYP2C9有抑制作用［16］;
参麦注射液不同的研究的出结论也不一样［11，18］。
已有的研究结果显示，同一种中药注射剂对CYP2C9酶可能会产生抑制或诱导作用，不同研究方式所到的结论存在差异，其原因可能为种属差异，体外反应体系的差异等。
中药的药物不良反应报道也日渐增多，其中中药注射液占中药不良反应的绝大多数。
中药注射液合理的配伍可以有效提高其使用的安全性，降低医疗成本。
研究中药注射液对CYP2C9酶的调控作用，可以评价经CYP2C9酶的代谢药物与中药注射液的相互作用，可以有效预防和避免因药物相互作用引起的药物不良反应，提高中药注射液使用的安全性。
通过综述发现近年来越来越重视中药对肝药酶活性的影响研究，科研技术不断更新，研究也不断深入，临床合理用药方面也越来越突出中药的指导意义。
我们需要不断改进更新实验方法，推动中药研究现代化进程。
深入研究中药注射液对肝药酶活性的影响，有利于进一步了解中药在临床上的合理应用，起到优化给药方案，提高临床用药的安全性和有效性。
参考文献
详见 中国临床药理学杂志 第33卷第12期2017年6月(总第242期)
免责声明
我们尊重原创作品。选取的文章已明确注明来源和作者，版权归原作者所有，如涉及侵权或其他问题，请联系我们进行删除。
内容由凡默谷小编查阅文献选取，排版与编辑为原创。如转载，请尊重劳动成果，注明来源于凡默谷公众号。返回搜狐，查看更多
责任编辑：