中国人体内发现“超级细菌”基因 对抗生素耐药性强
我要评论2015年11月20日 14:41:40来源：参考消息网
英媒称，研究人员11月18日说，在从中国人和猪体内采集的细菌（包括具有传染性的细菌样本）中，发现了一种能对终极抗生素产生强耐药性的新基因。
路透社11月18日报道称，科学家称这一发现“令人担忧”，并呼吁紧急限制多粘菌素的使用。多粘菌素是一种包含药用粘菌素并在畜牧业中广泛使用的抗生素。英国伯明翰大学微生物学教授劳拉·皮多克说：“所有多粘菌素的使用都必须尽快降至最低限度，并停止一切不必要的使用。”
以中国华南农业大学的刘华（音）为首的研究人员，在英国《柳叶刀·传染病》杂志上发表了他们的研究成果。他们在质粒上发现了这种名为mcr-1的基因。质粒是容易被复制并在不同细菌间转移的可移动DNA。
他们说，这说明该基因具有在细菌种群间传播和变化的“令人担忧的潜力”。
这个研究团队已发现了mcr-1基因在常见细菌之间转移的证据，比如在引发尿道及其他类型感染的大肠杆菌与引发肺炎及其他感染的肺炎克氏杆菌之间转移。
他们说，这说明“从多耐药性向泛耐药性的发展是不可避免的”。“虽然目前仅限于中国，但mcr-1很可能像其他耐药性基因一样……传播到全世界。”
日益传播的mcr-1耐药性基因被发现，令人想起2010年另一种所谓“超级细菌”基因NDM-1被发现的新闻。那种基因出现在印度，很快传播至全世界。
皮多克等人说，现在有必要建立全球mcr-1耐药性基因监控体系，努力阻止耐多粘菌素细菌的传播。
中国是全世界最大的农用和兽用粘菌素生产国和使用国之一。在中国进行的研究中，从2011年到2014年，研究人员从4个省份的屠宰猪体内以及广州市30个露天市场和27个超市销售的猪肉和鸡肉中采集了细菌样本。他们还对广东和浙江两家医院的感染患者体内细菌进行了分析。
他们发现，从动物和生肉中采集的大肠杆菌样本内存在mcr-1基因的比例很高。他们还说，令人担忧的是，阳性样本的比例逐年升高，而且在1322名住院患者的16份大肠杆菌和肺炎克氏杆菌样本中也发现了mcr-1基因。
澳大利亚昆士兰大学的戴维·佩特森和帕特里克·哈里斯在《柳叶刀·传染病》杂志上发表评论文章说，粘菌素在农业中的使用、屠宰动物体内的粘菌素耐药性、食物中的粘菌素耐药性、人体内的粘菌素耐药性之间的关系链现在已经完整。
他们说：“使这些环节脱钩的少数解决办法之一是限制或停止粘菌素在农业中的使用。否则就会引发大规模的公共卫生问题。”
资料图：基因双螺旋结构CG模型图。（图片源于网络）
【纠错】[责任编辑: 王秀 ]这个超级细菌是怎幺来的？下面的医学论文揭开了超级细菌神秘面纱，超级细菌来自转基因动物表达的抗体，人吃了转入MCR1基因抗体的动物可能会被感染，而转基因动物速生瘦肉猪，速生鸡，速生鱼，速生虾 早就覆盖了中国市场
hCR1及mCR1基因在Ecoli和Pichia Pastoris中的克隆表达及其抗体制备
沈阳药科大学 硕士学位论文 h-CR1及m-CR1基因在E.coli和Pichia Pastoris中的克隆表达及 其抗体制备 姓名:胡洋 申请学位级别:硕士 专业:生化与微生物药学 指导教师:夏焕章;王以光 2003.6.1 沈阳药科大学硕士学位论文 中文摘要 摘要 f h-CRl基因(Human Cell Regulatorl，细胞信号调节因子1，简称h. CRl，AC021016)为医科院医药生物技术研究所代谢工程室克隆发现的 新基因，初步研究表明该基因与肌肉收缩调控以及细胞信息传导和凋亡 过程相关，为一种膜蛋白。蛋白文库检索显示在小鼠、大鼠、牛、猪等 动物中有与h-CRl保守序列，而在酵母和苍蝇中没有相似序列，表明 CRl基因有可能局限于哺乳动物基因组中。_夕/。7 本研究通过生物信息学分析设计合成引物，分离C57BL/6J小鼠脾 脏细胞、提取总RNA，采用RT.PCR技术克隆得到了450bp大小的目的 条带，经测序证明包含一个与h-CRl基因高度同源的完整ORF，将此序 列命名m-CRl。比较发现，m.CRl与h-CRI蛋白具有极高的保守性，均 由142个氨基酸编码组成，两者间13处氨基酸差异有lO处为同族氨基 酸变异，同源性达到90.1%。 利用质粒pPIC9和pET24a(+)DNA构建了h-CRl基因毕赤酵母 GSll5表达载体及N端和/或C端带有融合蛋白的多种大肠杆菌BL21. CodonPlus(DE3).RIL表达载体。建立了h-CRl基因的甲醇酵母整合分泌 型表达系统，以及N端融合有T7-Tag的大肠杆菌包涵体型高效表达系 统。最终确定采用后者进行大量表达的蛋白制备抗体。用同样方法使m. CRl基因在大肠杆菌系统中获得成功表达。 f根据CRl蛋白为膜蛋白的理化性质，采用了包涵体溶解液透析收集 沉淀、制备电泳、电洗脱的方法进行融合蛋白的纯化，得到纯度约 95%，浓度约2mg/ml的蛋白样品。利用纯化的Tag-hCRl和Tag-mCRl 融合蛋白免疫兔子制备了兔抗二者的多克隆抗体。分别用免疫单扩、 ELISA和Western等多种方法进行定性、定量分析，检测所制备抗体滴 度达到1:1×105以上，特异性较好。本论文的工作为进一步在免疫学及 细胞学方面研究CRl的生物学功能提供了可能。人卢‘~ 关键词:CRl，膜蛋白，毕赤酵母，多克隆抗体i大肠杆菌，基因表达? l 沈1铂药科大学硕士学位论文 英文摘要 Abstract Theh-CRl(HumanCell Regulator 1.GenBankaccession number AC021016)isanovelhuman gene clonedinthelabof Dept.ofPathway Engineering at theInstituteofMedicinal Biotechnology.Theyeasttwo-hybrid screening(using thehumanskeletonmusclecDNAas library)indicated thath- CRlisrelatedwiththe proteins involvedin regulation ofmusclecontraction andcell signal transduction.Online proteinpredictionanalysis showedthat thereisatransrnembrane re?on inthis protein?and therewere homologous genesequences in mouse，mt，cattle and piggenome，but noneinthe yeast and flygenome.Thissuggested thatCRl gene would onlypresent inmammalian genome. Primerswere designed and synthesizedthrough bioinformaties analysis， totalRNA诵邵extractedfromthemouseC57BL/6J spleen cells.thenaeDNA ofa0.5kb DNA fragment wasobtained by RT-PCR technique.Sequence analysis indicatedthatit containsa complete ORF?namedm-CRl(GenBank accessionnumber AY299972).coding 142aminoacidswhichshows90.1% identity withtheknownh-CRl protein.Blast Searchrevealedthattherewere 13aminoacidsdifferencesbetweenm-CRlandh-CRl protein?among them 10werehomo-aminoacids changes，proved thattheh-CRlandm-CRIare higllly conserved. Throbgh in vitro recombinationwith plasmidspPIC9 and pET24a(+)， severalofh-CRl geneexpress vectorsinPichia pastoris GSll5andE.coli BL21.CodonPlus(DE3)-RILsystem wereconstructed.An integrated and secrete expressionsystem forh-CRI gene inPichia pastoris Wasestablished. TheeffectofN.terminaland/orC-terminal tag fusedwithh-CRl gene onthe expression ofh-CRl gene inEcoli system was compared.The resultshowed thath-CRI proteinexpressed asinclusion body with hi曲efficiency whenitis fusedwithN-terminal T7一Tag.Thisstrategy Wasalso applied to express m一 2 沈阳药科大学硕士学位论文 英文摘要 CRI proteinsuccessfully inEcoli. ’ According tothe physico-chemical characterofCRlasamembrane protein. Tag-hCRl and Tag-mCRlfusingproteins were purified withseveral following steps.The solutionofre-naturedinclusion boay was dialyzed and precipitation waS collected，targetproteins Wel-e separatedby preparative SDS-PAGE electrophoresis，and electricelutionthen applied to recovery the proteins.The concentration ofpurifiedproteins V，ere 2mg/ml with the purity about95%. Purified proteins wereusedtoimmunizerabbitsandthe anti? ? Tag--hCRl and anti-Tag-mCRlpolyclonal antibodieswere prepared.The titerofthe prepared antiserumswereabout1:10’with higla immune specificity?determinedby single immuno-diffusion test，ELISA andWesternBlot.Thisworkmadeit possible to f_Ilrther study thecytobiologieal methods. KEYWORDS:CRI，Membrane protein，Pichiapastoris。biological function ofCRl gene with immunological and
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